關(guān)鍵詞:(原核)可溶蛋白表達(dá)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
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(原核)可溶蛋白表達(dá)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧，承諾客戶不成功不收費(fèi)。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時(shí)，我們也會(huì)提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費(fèi)精力重復(fù)實(shí)驗(yàn)。另一方面，我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信，我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒，客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品品牌：(原核)可溶蛋白表達(dá)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)   *************************/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
實(shí)驗(yàn)描述  
利用基因合成、cDNA克隆、反轉(zhuǎn)錄等方法，獲得目的基因，將目的基因亞克隆至表達(dá)載體pSumo-Mut，目的基因在N端融合Sumo標(biāo)簽蛋白，通過(guò)測(cè)序和酶切驗(yàn)證，確證獲得亞克隆正確的表達(dá)質(zhì)粒。
    利用構(gòu)建好的表達(dá)質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化Arctic Express宿主菌， 在11度低溫IPTG誘導(dǎo)條件下，SDS-PAGE檢測(cè)目標(biāo)蛋白表達(dá)情況，確認(rèn)蛋白分布在上清或是沉淀中。
    如果目標(biāo)蛋白產(chǎn)物分布與上清中，通過(guò)Ni柱親和純化， 獲得目的蛋白；如果目標(biāo)蛋白分布于沉淀中，則通過(guò)包涵體梯度洗脫后，重溶獲得目標(biāo)蛋白，必要的話，重溶蛋白在進(jìn)一步通過(guò)親和純化提高純度。
    純化后的蛋白經(jīng)過(guò)Sumo蛋白酶酶切，蛋白N端將會(huì)徹底裸露，不留任何氨基酸殘基，酶切后的混合物經(jīng)Ni柱親和純化，可以去除融合蛋白、Sumo標(biāo)簽蛋白和Sumo蛋白酶，剩余的蛋白即為酶切后目的蛋白。
服務(wù)內(nèi)容
針對(duì)客戶蛋白表達(dá)不理想的問(wèn)題，我公司根據(jù)客戶提供的基因序列對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行整套優(yōu)化（基因設(shè)計(jì)、基因優(yōu)化、基因合成、亞克隆、蛋白表達(dá)條件優(yōu)化及可溶性測(cè)試、原核蛋白表達(dá)及檢測(cè)），并提供給客戶實(shí)驗(yàn)中每個(gè)步驟詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
交付
實(shí)驗(yàn)各階段的實(shí)驗(yàn)評(píng)估報(bào)告（分為密碼子優(yōu)化報(bào)告、載體-宿主優(yōu)化報(bào)告、表達(dá)條件優(yōu)化報(bào)告和蛋白可溶性評(píng)估）
如果客戶需要蛋白，我們可提供：
>5mg 可溶性蛋白
蛋白純度>90%
融合標(biāo)簽蛋白